高考生物知識點之基因工程及其應用
來源：中學學科網 2012-10-10 15:15:04
1.概念：按照人們的意愿，把一種生物的某種基因提取出來，加以修飾改造，然后放到另一種生物的細胞里，定向地改造生物的遺傳性狀。
2.原理基因重組
3.工具：
A．基因的"剪刀"：限制性內切酶
①分布：主要在微生物中。
②作用特點：特異性，即識別特定核苷酸序列，切割特定切點。
③結果：產生黏性未端（堿基互補配對）。
B．基因的"針線"：DNA連接酶
①連接的部位：磷酸二酯鍵，不是氫鍵。
②結果：兩個相同的黏性未端的連接。
C．基因的"運載工具"：運載體
①作用：將外源基因送入受體細胞。
②具備的條件：a、能在宿主細胞內復制并穩定地保存。b、具有多個限制酶切點。
c、有某些標記基因。
③種類：質粒、噬菌體和動植物病毒。
④質粒的特點：質粒是基因工程中最常用的運載體。
4．基因操作的基本步驟：
①提取目的基因：人們所需要的特定基因，如人的胰島素基因、抗蟲基因、抗病基因、干擾素基因等
②目的基因與運載體結合（以質粒為運載體）：用同一種限制酶分別切割目的基因和質粒DNA（運載體），使其產生相同的黏性末端，將切割下的目的基因與切割后的質粒混合，并加入適量的DNA連接酶，使之形成重組DNA分子（重組質粒）
③將目的基因導入受體細胞常用的受體細胞：大腸桿菌、枯草桿菌、土壤農桿菌、酵母菌、動植物細胞
④目的基因檢測與表達
檢測方法如：質粒中有抗菌素抗性基因的大腸桿菌細胞放入到相應的抗菌素中，如果正常生長，說明細胞中含有重組質粒。
表達：受體細胞表現出特定性狀，說明目的基因完成了表達過程。如：抗蟲棉基因導入棉細胞后，棉鈴蟲食用棉的葉片時被殺死；胰島素基因導入大腸桿菌后能合成出胰島素等。
5．轉基因生物和轉基因食品的安全性
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